CWL-M萃取設(shè)備對(duì)草本植物中總黃酮提取工藝研究

CWL-M萃取設(shè)備對(duì)草本植物中總黃酮提取工藝研究

探討常壓下水煎煮法提取草本植物中總黃酮的工藝。防法」采用料液比、煎煮溫度和煎煮時(shí)間為主要因素進(jìn)行正交試驗(yàn)，以確定總黃酮的最佳提取工藝。嘴果」草本植物中總黃酮的最佳提取條件為料液比1:5 g/L?煮沸，煎煮時(shí)間75 min，在此條件下總黃酮得率約為0. 734% 。為后續(xù)草本植物飲料產(chǎn)品的研發(fā)提供了相關(guān)資料。

近年來(lái)，隨著生活水平的提高，人們對(duì)于保健越來(lái)越重視，對(duì)于保健品的認(rèn)識(shí)也逐漸趨于理性化。由此，促進(jìn)了一些基于草本植物保健飲品生產(chǎn)企業(yè)的發(fā)展。草本植物中含有各種生物活性成分，如總黃酮、總皂普、各種活性多糖以及一些抗氧化物質(zhì)等。目前，對(duì)于草本植物中各種活性成分的提取主要有水煎煮法、超臨界流體萃取、超濾膜分離技術(shù)、大孔吸附樹脂分離純化技術(shù)、超聲提取技術(shù)以及微波萃取技術(shù)等。其中，水煎煮法是最傳統(tǒng)的提取方法，它是在草本植物中加入適量的水，然后加熱至一定溫度并保持一定時(shí)間后濾出煮液的方法。該方法不僅簡(jiǎn)便易行，而且能煎出大部分有效成分，是最常用的提取草本植物中活性成分的方法之一。筆者以某公司提供的草本植物為原料，研究水煎煮法提取其總黃酮的工藝，以期為后續(xù)草本植物飲品的研發(fā)提供相關(guān)資料。

草本植物中總黃酮提取工藝。工藝流程見圖1。

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具體步驟為:取一小包裝草本植物，平均約170 g，用清水反復(fù)沖洗3次，清除表面雜質(zhì)和灰塵等。按料液比1:5 g幾加水，加熱至沸騰并維持75 min，使草本植物中的總黃酮最大量浸出。煎煮結(jié)束后，先采用6層紗布進(jìn)行粗濾，濾除較大的草本植物殘?jiān)脼V液再用高速離心機(jī)5 000 r/min離心10min，分離除去細(xì)微殘?jiān)詈蟮贸吻逄崛∫?。測(cè)定所得提取液中的總黃酮含量。

總黃酮含量測(cè)定。

蘆丁對(duì)照品溶液配制。精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁50. 5 mg，置于250 ml容量瓶中，加甲醇溶解，置水浴上微熱溶解，冷卻，加甲醇至刻度，搖勻，即得0. 202mg / ml蘆丁對(duì)照品溶液。

測(cè)定波長(zhǎng)的選擇。

精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液及草本植物提取液各4 ml，置于25 ml量瓶中，加5 % NaNO2溶液1 ml，搖勻，放置6 min，加Al ( NO3 ) 3溶液1 ml，搖勻，放置6min，加4% NaOH溶液1 ml，再用水稀釋至刻度，搖勻，15 min后置1 cm比色皿中，隨行試劑作空白對(duì)照，在300 ~600 nm掃描，找到最大吸收波長(zhǎng)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0 ml置于25 ml量瓶中，。以濃度(C)與吸光值(A)進(jìn)行直線回歸，得線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)。

樣品中總黃酮含量測(cè)定。精密吸取草本植物提取液4 ml于25 ml容量瓶中，平行操作3次，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

為確定總黃酮的最佳提取工藝，以料液比、煎煮溫度和煎煮時(shí)間為主要因素進(jìn)行正交試驗(yàn)。正交試驗(yàn)因素水平見表to1.2.4總黃酮得率計(jì)算。根據(jù)以下公式計(jì)算:

????總黃酮得率=(提取液中總黃酮的含量/草本植物試樣的質(zhì)量)x 100%

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制經(jīng)波譜掃描蘆丁最大吸收波長(zhǎng)為510 nm，在510 nm處測(cè)定不同濃度下蘆丁溶液的吸光值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖2。

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由圖2得線性回歸方程為A =12. 369C -0. 1191，相關(guān)系數(shù)(R2)為0. 924 5，曲線在0.01~0.05?mg / ml范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

????最佳提取工藝的確定由表2可知，3個(gè)因素對(duì)總黃酮提取的影響主次關(guān)系為煎煮溫度>料液比>煎煮時(shí)間，同時(shí)得出最佳工藝為料液比1:7 g/L，沸水，煎煮時(shí)間75 min，此時(shí)所得提取液中總黃酮含量為1 280 mg。從表2還可以看出，料液比也可選為1:5 g/L，在此條件下提取液中總黃酮含量為1 247 mg，雖然產(chǎn)量稍低，但可為企業(yè)大幅度降低生產(chǎn)成本。因此，最終確定總黃酮的提取工藝為料液比1:5 g/L，沸水，煎煮時(shí)間75 min，此時(shí)總黃酮得率約為0. 734%

3小結(jié)

????試驗(yàn)以草本植物為原料，采用傳統(tǒng)水煎煮法提取其中的生物活性物質(zhì)總黃酮，并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際得出最佳提取工藝條件:料液比1:5 g/L，沸水，煎煮時(shí)間75 min，此條件下總黃酮得率約為0. 734% .

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