神經(jīng)酰胺廣泛存在于動(dòng)植物體內(nèi),是由神經(jīng)鞘氨醇和長(zhǎng)鏈脂肪酸縮合而成的酰胺類物質(zhì),分子式中通常具有酰胺基、多羥基以及不同長(zhǎng)度的長(zhǎng)鏈烷基鏈等基團(tuán),具有親水親油的雙親特性。神經(jīng)酰胺是細(xì)胞膜的組成成分神經(jīng)鞘磷脂的基本單位,與細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等密切相關(guān),具有屏障、保濕、美白、抗衰老、抗腫瘤等功效。過去在工業(yè)應(yīng)用中主要作為化妝品添加劑使用,近年來,神經(jīng)酰胺在食品和藥物領(lǐng)域的功能也逐漸被發(fā)現(xiàn),目前被廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化妝品領(lǐng)域。
神經(jīng)酰胺的來源可分天然和化學(xué)合成兩類,天然神經(jīng)酰胺通常來源于植物性提取、動(dòng)物源提取以及發(fā)酵菌發(fā)酵提取。目前應(yīng)用以天然的神經(jīng)酰胺產(chǎn)品為主。而現(xiàn)有天然的神經(jīng)酰胺均是通過從動(dòng)植物來源例如酵母、植物、哺乳動(dòng)物中分離得到,由于動(dòng)物源存在疾病等原因,其安全性受到質(zhì)疑。而植物源神經(jīng)酰胺含量極低,其提取效率不高且成本昂貴。
發(fā)酵法制備神經(jīng)酰胺兼具安全性和高含量特點(diǎn),屬于可以人為控制神經(jīng)酰胺目標(biāo)物富集程度的方法,尤其是隨著發(fā)現(xiàn)越來越多的高產(chǎn)神經(jīng)酰胺且無毒的菌種例如釀酒酵母菌、假絲酵母菌和漢遜氏酵母菌,其在工業(yè)化生產(chǎn)中展現(xiàn)出巨大潛力。
盡管發(fā)酵法的神經(jīng)酰胺含量相對(duì)更高,但是由于發(fā)酵液中存在大量的培養(yǎng)基成分以及微生物代謝產(chǎn)物,再加上破碎菌體或發(fā)酵基質(zhì)等因素,導(dǎo)致產(chǎn)量低,成本高。因此,必須要開發(fā)基于微生物發(fā)酵液原料,開發(fā)工藝操作相對(duì)簡(jiǎn)單、成本低廉,適合大批量快速純化且產(chǎn)品收率和純度較高的神經(jīng)酰胺提取分離技術(shù)。針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中從發(fā)酵液提取神經(jīng)酰胺存在的分離效率低、溶劑消耗大、產(chǎn)物純度低以及無法進(jìn)行大批量快速分離等問題,我們提供了一種基于液相萃取-固相萃取相結(jié)合的聯(lián)合萃取工藝以分離純化發(fā)酵液中的神經(jīng)酰胺。其流程主要包括:過濾除雜和初步萃取預(yù)處理——初步萃取——雙水相萃取。
其工藝流程主要為:將經(jīng)過初步固液分離或破壁勻漿處理后的含神經(jīng)酰胺發(fā)酵液,經(jīng)進(jìn)一步過濾處理或離心處理去除殘留固體雜質(zhì)后,向除雜濾液中加入適量氫氧化鈉,調(diào)整ph至堿性,采用石油醚作為萃取劑,采用CWL-M系列連續(xù)離心萃取機(jī)進(jìn)行萃取,并對(duì)萃取后的水相采用石油醚混合萃取溶劑重復(fù)萃取2-5次,將有機(jī)相蒸發(fā),回收有機(jī)溶劑,對(duì)所得產(chǎn)品充分干燥,即可得到含神經(jīng)酰胺的粗品原料。
CWL-M系列離心萃取機(jī)相較于傳統(tǒng)的混合分離設(shè)備,其工作原理有著本質(zhì)的區(qū)別。反應(yīng)釜在進(jìn)行分離過程中由于人為操作不可避免會(huì)產(chǎn)生夾帶,另外反應(yīng)釜利用重力分離原理,過程較慢,分離效率低并且分離不徹底。CWL-M系列離心萃取機(jī)是利用離心力將兩相液體進(jìn)行快速混合分離,混合傳質(zhì)速度快,萃取效率高,分離徹底,沒有夾帶現(xiàn)象出現(xiàn)。


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